唾液铁调素检测试剂盒
德国DRG公司推出了新的、*的唾液铁调素检测试剂盒,目前唾液的检测的样本采集比较方便,处理也比较简单,可检测的用途也越来越广了。本文介绍的唾液铁调素检测试剂盒采用的是ELISA方法,该方法操作简单方便,拥有灵敏度高特异性强的特点,检测时间短,检测结果准确,目前ELISA方法已经在普遍运用。
AG九游国际生物可提供唾液铁调素检测试剂盒,以及其他唾液检测的试剂盒,并且有提供唾液检测的服务,会提供一份准确的数据报告,详细的流程以及内容可联系我们进行了解。下面是唾液铁调素检测试剂盒的产品信息摘要,仅供参考。
通用名称:唾液铁调素检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Salivary Hepcidin ELISA
产品规格:96T
产品货号:SLV6082
产品品牌:德国DRG
检测方法:ELISA
供应商家:深圳市AG九游国际生物工程有限公司
预期用途
唾液铁调素检测试剂盒用于定量检测唾液中的铁调素。仅用于科研使用。
铁调素介绍
铁调素是铁稳态调节肽。生物活性肽铁调素-25主要是通过蛋白水解酶切前肝素素的C端25个氨基酸而在肝脏中产生的。随后的铁调素-25的N末端加工产生较小的20-24个氨基酸的肽,这些肽显示出大大降低的活性并在尿液中积累。尽管初被鉴定为抗微生物肽,但是铁调素-25现在已被确定为膳食铁吸收和细胞铁释放的主要调节剂。
铁调素通过抵消铁转运蛋白的功能来发挥其调节功能,铁转运蛋白是巨噬细胞,肝细胞和肠上皮细胞基底外侧部位的主要细胞铁输出物。铁调素-25诱导铁转运蛋白的内在化和降解,导致细胞内铁存储增加,饮食中铁的吸收减少和循环铁浓度降低。在对铁缺乏,缺氧,贫血和红细胞生成等循环铁需求增加的条件下,肝细胞铁调素的合成减少。相反,铁调素的合成是由炎症和感染引起的。
在血清中,铁调素-25已被证明是诊断各种特定疾病状况的有用生物标志物。除血清中存在铁调素-25外,还确认其存在于人唾液中。唾液中铁调素-25的测定具有无创且无压力的样品采集优势,而无需医务人员。
检测原理
唾液铁调素检测试剂盒采用的竞争法。微量滴定孔用针对铁调素分子抗原位点的单克隆(小鼠)抗体包被。患者样品中的内源性铁调素与铁调素-生物素结合物(酶结合物)竞争与被包被抗体的结合。温育后,洗涤微量滴定板以终止竞争反应。
在随后的温育中,结合的生物素分子用链霉亲和素过氧化物酶(酶复合物)检测。温育后,将板再次洗涤。添加底物溶液后,显色的强度与患者样品中铁调素的浓度成反比。
唾液铁调素检测试剂盒组成成分
名称 | 数量 | 成分 |
微孔板 | 12×8 | 96孔,包被了单克隆的抗铁调素抗体。 |
标准品(0-6) | 7×1ml | 冻干、浓度:0、250、500、1000、2000、4000、8000pg/ml。转换系数:1pg/ml=0.359pmol/l。 |
质控品 | 2×1ml | 冻干、具体浓度见质控单。 |
酶联物 | 1×14ml | 即用型、内含生物素标记的铁调素。 |
酶复合物 | 1×14ml | 即用型、内含链霉亲和素与辣根过氧化物酶结合物。 |
底物液 | 1×14ml | 即用型、内含TMB。 |
终止液 | 1×14ml | 即用型、内含0.5M的H2SO4 。 |
洗涤液 | 1×30ml | 40倍浓缩 |
实验所需材料(未提供)
●酶标仪(450±10nm)
●移液管
●吸水纸
●蒸馏水或去离子水
●计时器
●半对数图纸或用于数据缩减的软件
贮存条件
当储存在2℃至8℃时,未开封的试剂将保持反应性直至失效日期。不要使用超过此日期的试剂。打开的试剂必须在2℃至8℃下储存。微量滴定孔必须在2℃至8℃下储存。打开铝箔袋后,应小心再次将其紧紧关闭。如果如上所述储存,打开的试剂盒保持活性8周。
检测步骤
每次运行必须包含一条标准曲线。
1、在框架固定器中固定所需数量的微量滴定孔。
2、用新的一次性吸头分配100 µL的每个标准品,质控品和样品(上清液)到适当的孔中。
3、在每个孔中分配100 µL酶联物。*混合10秒钟。在此步骤中进行充分混合非常重要。
4、在室温下孵育60分钟。
5、轻摇孔中的内容物。每孔用400 µL稀释的洗涤溶液冲洗孔4次(如果使用了平板清洗机)-或-每孔用300 µL稀释的洗涤溶液冲洗孔4次以进行手动洗涤。在吸收纸上剧烈打孔以去除残留的液滴。重要的提示:正确执行洗涤程序会明显影响该测定的灵敏度和精确度!
6、将100 µL酶复合物分配到每个孔中。
7、在室温下孵育30分钟。
8、轻摇孔中的内容物。每孔用400 µL稀释的洗涤溶液冲洗孔4次(如果使用了平板清洗机)-或-每孔用300 µL稀释的洗涤溶液冲洗孔4次以进行手动洗涤。在吸收纸上剧烈打孔以去除残留的液滴。
9、向每个孔中添加100 µL底物溶液。
10、在室温下孵育15分钟。
11、通过向每个孔中添加100 µL终止液来终止酶促反应。
12、用微量滴定板读数器测定每个孔在450±10 nm处的吸光度(OD)。建议在添加终止液后10分钟内读取孔。
代理商家:深圳市AG九游国际生物工程有限公司
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