褪黑激素硫酸盐ELISA试剂盒
通用名称:褪黑激素硫酸盐试剂盒
英文名称:Melatonin-Sμlfate Urine
产品规格:96T
产品货号:RE54031
产品品牌:德国IBL
代理商 :AG九游国际生物公司
褪黑激素硫酸盐试剂盒预期用途
褪黑激素硫酸盐试剂盒可用于人尿液中褪黑激素硫酸盐(又叫6-羟基褪黑激素硫酸盐和6-硫酸褪黑激素)的体外定量检测。
前言简介
松果体因其在光周期现象中的重要作用,已经被人们认为是神经内分泌的传感器。松果体主要分泌的激素是:N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素,褪黑激素一般是由色氨酸合成而来的。血浆褪黑激素的浓度可在夜间达到*。褪黑激素*的波动变化可以反映出一些关于时间变化的信息,如夜晚的长短。褪黑激素的分泌会受到神经系统的调节。交感神经系统在调节褪黑激素分泌方面发挥有重要作用,它主要是通过释放去甲肾上腺素来调节的。
据报道,褪黑激素分泌方式和水平的变化与人的一些生理状态一致,如:失眠、时差感、情绪低落、压力大、精神分裂症、丘脑下部性闭经、妊娠、神经想食欲缺乏、某些癌症、免疫系统紊乱和青春期性成熟的影响。大多数循环褪黑激素都可在肝内代谢成6-羟基褪黑激素,之后变成6-硫酸褪黑激素而随尿液排除。尿液中6-羟基褪黑激素硫酸盐的浓度与血液中褪黑激素的总水平有很好的相关性。
褪黑激素硫酸盐试剂盒检测原理
褪黑激素硫酸盐试剂盒利用的是竞争法的原理。样品中未知量的抗原和一定量的酶标抗原竞争性结合到包被在微孔中的抗体结合位点上。温育后洗板以终止竞争反应。加入底物液后,溶液所显示的颜色强度与样品中抗原的量成反比。样品的实验结果可以从标准曲线上直接获取。
储存与稳定
褪黑激素硫酸盐试剂盒必须在2-8℃的环境下运输和储存,避免太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂准备将在相关章节中阐述。如果将包被板密封并储存于2-8℃的环境下时,试剂在有效期内稳定。
褪黑激素硫酸盐试剂盒组成成分
数量 | 标记 | 成分 |
1×12×8 | MTP | 包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,多*)。 |
1×6ml | ANTISERUM | 褪黑激素硫酸盐抗血清,即用,内含:兔抗血清、Tris缓冲液和0.01%的硫柳汞 |
1×0.2ml | ENZCONJ CONC | 酶联物,40倍浓缩,内含过氧酶标记的褪黑激素硫酸盐、Tris缓冲液和1%的硫柳汞。 |
1×7×0.1ml | CAL A-G | 标准品A-G,0;1.7; 5.2; 15.6; 46.7; 140; 420ng/mL 0;5.2;15.9;47.6;142;427;1281nmol/L。即用,内含褪黑激素硫酸盐、Tris缓冲液和0.01%的硫柳汞。 |
1×2×0.1ml | CONTROL 1+2 | 质控品1+2,即用,内含0.02%的;硫柳汞。具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签。 |
1×80ml | ASSAYBUF CONC | 检测缓冲液,红色,即用,内含Tris缓冲液、BSA和0.01%的硫柳汞。 |
1×50ml | WASHBUF CONC | 洗涤液,20倍浓缩,内含磷酸缓冲液、吐温和0.1%的硫柳汞。 |
1×15ml | TMB SUBS | 底物液 |
1×15ml | TMB STOP | 终止液,即用,1M的H2SO4。 |
3× | FOIL | 粘性金属板 |
实验所需器材,不提供
1、移液器,体积:10; 50; 100; 1000μl
2、试管(12×75mm)
3、试管架
4、振荡器(500rpm)
5、旋涡混合器(500rpm)
6、带储器的8道移液器
7、洗涤瓶,自动或半自动洗板机
8、酶标仪450nm(参考波长:600-650nm)
9、蒸馏水或去离子水
10、吸水纸、取样吸头和计时器
褪黑激素硫酸盐试剂盒检测步骤
1 | 将已稀释好的标准品、质控品和病人样品分别50μl加入到相应的微孔中。 |
2 | 在每一微孔中加入50μl临时配置好的酶联物。 |
3 | 在每一微孔内加入50μl褪黑激素硫酸盐抗血清。 |
4 | 盖板,室温(18-25℃)包被板振荡器(500rpm)温育2小时。 |
5 | 移去粘性金属板,弃取孔内反应液,每孔用250μl稀释好的洗涤液洗板4次,吸水纸上拍干以除出残余液体。 |
6 | 如果可以的话,请用8道移液器加底物液和终止液。加底物液和终止液的时间间隔应当相同,使用主动置换型移液器并避免气泡产生。 |
7 | 在每一微孔中加入100μl TMB底物液。 |
8 | 室温(18-25℃)包被板振荡器(500rpm)温育30min。 |
10 | 在每一微孔中加入100μl TMB终止液,轻请振板以混合溶液。 |
11 | 加终止液后60min内在450nm处读取OD值。 |
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