利什曼原虫试剂盒
AG九游国际生物公司是德国DRG公司的代理商,专注生物免疫学研究二十多年,有专业的技术团队,可为您提供专业的代测服务以及采用进口的试剂盒进行检测,并有详细的检测报告回馈给您。
本次介绍的是德国DRG公司的利什曼原虫试剂盒,包含的是利什曼原虫抗原,可用于人的血液中利什曼原虫IgG抗体的体外筛查检测。德国DRG品牌的利什曼原虫试剂盒采用的是ELISA方法进行检测,操作简单方便,产品灵敏度高、特异性强,技术要求简单,仅需酶标仪即可读取数据,检测时间较短,能够同时检测更多人份,节省很多时间成本。产品质量有保障,欢迎您前来咨询了解。
中文名称:利什曼原虫IgG试剂盒
英文名称:Leishmania IgG Kit
产品规格:96T
产品品牌:德国DRG
产品货号:EIA3492
利什曼原虫试剂盒预期用途
利什曼原虫试剂盒可用于人血清中抗内脏利什曼原虫IgG的筛查检测。仅用于科研使用。
利什曼原虫介绍
内脏利什曼病(VL)是一种死亡率的恶性疾病,主要由杜氏利什曼原虫引起。白蛉是VL传播的主要媒介,而狗是白蛉的主要携带者。VL是许多国家的一种地方性疾病,在大多发展中国家中,VL也是一个严重的问题,特别在那些人口集中的城市里。
这种疾病在拉丁美洲、东非、中东、印度和中国都有很高的发病率。VL也会传播到靠近地中海的一些国家去,如意大利、法国南部、西班牙、葡萄牙和非洲南部。在欧洲南部,VL已成为AIDS病人中主要的机会性传染病。急性VL的诊断通常是通过抽吸骨髓来直接鉴别其寄生虫。
这种鉴定方法对人体有侵袭性,疼痛并且危险,而且经常因不能从组织中分离到寄生虫而使得鉴定的成功率非常小。另外,在急性疾病阶段,抗利什曼原虫抗体的滴度非常高,血清筛查的方法已广泛被应用。ELISA应当是VL血清学诊断的首要实验方法,尽管免疫荧光抗体检测和直接凝集实验检测的是整个寄生虫,但它们仍然被广泛应用(ELISA一起用或单独用)。
利什曼原虫试剂盒实验原理
在初次温育时,病人血清中的抗体结合到检测孔的抗原上。在第二次温育时,酶复合物可结合到抗原抗体复合物上。洗板除去未结合的酶联物,加入显色剂,有酶联物和过氧化物酶的情况下会显示蓝色。之后加入终止液终止酶反应,此时溶液由蓝色变成黄色。
利什曼原虫试剂盒组成成分
名称 | 数量 | 成分 |
包被板 | 96人份 | 包被了利什曼原虫抗原的微孔板(可拆卸板条) |
阳性质控 | 1瓶,装1ml | 已稀释好的利什曼原虫阳性人血清和含硫柳汞的缓冲液。 |
阴性质控 | 1瓶,装1ml | 已稀释好的利什曼原虫阴性人血清和含硫柳汞的缓冲液。 |
显色剂 | 1瓶,装11ml | TMB显色剂。 |
酶联物 | 1瓶,装11ml | 辣根过氧酶标记的抗人IgG和含硫柳汞的稳定缓冲液。 |
洗涤液 | 1瓶,装25ml | 20倍浓缩的缓冲液和含硫柳汞的表面活性剂。 |
稀释缓冲液 | 2瓶,装30ml | 含硫柳汞的蛋白缓冲液。 |
终止液 | 1瓶,装11ml | 1M的硫酸。 |
储存条件
利什曼原虫试剂盒储存于2-8℃的环境下。含洗涤液的洗涤瓶必须储存在室温下。
准备
洗涤缓冲液:打开试剂瓶,在其中加入475ml去离子水,之后将稀释好的洗涤缓冲液到入塑料挤瓶。
实验样品:用稀释缓冲液制备1:40的病人血清。
血清的采集与准备
采集全血样品,获取血清,如果样品不立即检测,可以将它冻存于-20℃或更低的温度下。不要使用热灭活血清,避免反复冻融样品。
利什曼原虫试剂盒实验步骤
1、取出实验所需数目的板条并置于板架上。
2、在微孔1中加入100ul阴性质控,微孔2中加入100ul阳性质控,剩余的孔中分别加入100ul 40倍稀释的样品。
注意:阴性质控和阳性质控都是以预先稀释好了的,不必再稀释。
3、室温温育10min。
4、弃取孔内反应液,用洗涤液洗板3次。
5、在每一微孔中加入2滴酶联物。
6、室温温育10min。
7、弃取孔内反应液,用洗涤液洗板3次。
8、在每一微孔中滴加2滴显色剂。
9、室温温育5分钟。
10、在每一微孔中滴加2滴终止液,振板以使溶液混合均匀。
11、加终止液后450nm处读取OD值(参考波长:620-650)。洗板时应该加满每个孔,弃取孔内反应液,并反复洗3次。
A、洗板时避免产生泡沫。
B、每次实验都必须包含质控品。
结果说明
分光光度计:450nm和620-650nm处读取OD值。
阳性:OD值大于或等于0.2。
阴性:OD值小于0.2。
视觉:如果反应液所显示的颜色很明显,则样品应当被视为阳性。
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