人胎盘催乳素检测试剂盒(ELISA法)
通用名称:胎盘催乳素检测试剂盒(ELISA法)
英文名称:hPL ELISA
产品规格:96T
产品货号:EIA1283
产品品牌:德国DRG
注册证号:国械注进20162401516
HPL检测试剂盒预期用途
HPL检测试剂盒可用于人血清中胎盘催乳素的定量检测。可用于临床使用。
HPL前言简介
HPL的是生理学功能到目前为止还未确定,但它很大程度上与人生长激素一样是孕期胎儿胎盘和生理变化的调节者,这表明母体血清HPL的水平可以反映胎盘的功能。
在(胎儿)宫内死亡、婴儿分娩疼痛和生产时胎儿窒息的病例中,其人胎盘催乳素(HPL)水平会降低。如果HPL的低水平重复出现,那么这种相关性就特别明显,它表明子宫长期处于这种状态就会使胎儿受到损害。如果孕期正常,母体HPL水平降低(的情况)一般不会出现。在单胎妊娠中,如果HPL水平升高则意味着zui高的妊娠结果。然而高水平的HPL也有可能意味着婴儿潜在某些特定疾病,如糖尿病婴儿先天肥胖性巨体、新生儿溶血症和胎儿水肿病的重要病理学原因。
HPL检测试剂盒检测原理
HPL检测试剂盒是一种基于夹心法原理的固相酶联免疫吸附实验(ELISA)。微孔板上包被有能结合HPL分子上*抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性HPL的病人样本在包被孔中与酶联物进行温育,该酶联物是一种联结有辣根过氧化物酶的抗HPL抗血清。温育后,用洗涤液洗去未结合的酶联物。辣根过氧化物酶的结合总量与样本中HPL的浓度成正相关。加入底物溶液后,显出的颜色强度与病人样品中HPL的浓度成正比。
HPL检测试剂盒组成成分
名称 | 数量 | 成分 |
微孔板 | 12×8 | 包被有抗HPL的单克隆抗体 |
标准品 | 4×0.5ml | 即用型、浓度:1.25、5、10、20mg/L 转换系数:1mg/L=1mIU/L、含无汞防腐剂 |
高/低质控品 | 2×0.5ml | 即用型、具体浓度见质控单 |
酶联物 | 1×11ml | 即用型 |
底物液 | 1×14ml | 即用型 |
终止液 | 1×14ml | 即用型、内含0.5M的H2SO4 |
零标准品样品稀释液 | 1×90ml | 即用型 |
所需材料(未提供)
1、酶标仪 (450±10nm)
2、移液器
3、吸水纸
4、蒸馏水或者去离子水
5、计时装置
6、用于样品稀释的试管(12×75mm)
7、半对数坐标纸或者数据处理软件
储存条件
HPL检测试剂盒在2~8℃下储存,在有效期内可以保持活性。不要使用过期试剂。开封的试剂必须保存在2~8℃。微孔板必须在2~8℃下储存。一旦包装袋被打开,必须将它小心地严封起来。开封的试剂盒按上述条件保存,6周内可保持活性。
样本要求
1、样品的采集:血清,静脉穿刺采集全血,待其凝血,在室温下用离心机分离血清。未*凝血前请勿离心,接受了抗凝剂治疗的病人样品可能需要更长的凝血时间。
2、样品的储存:必须盖住样本并在实验之前于2~8℃下可储存至5天。样品需要更长的储存时间,必须在实验之前于-20℃下一次性冻存。融化的样本在检测之前必须要上下倒置几次。
3、样品的稀释:实验开始前,必须用零标准品按1:100的比例稀释样品。首先在每一样品试管中加入1ml零标准品,再向相应的试管中加入10μL样品,把所有的试管在旋涡混合器上混合10秒(避免气泡)。
4、在*实验中,样品中HPL浓度高于zui高标准品的必须用零标准品进行进一步的稀释并按实验步骤中再次重做实验。在计算样品浓度时就应当把此稀释因子考虑进去。
HPL检测试剂盒检测步骤
1、将所需数量的板条固定到板架上。
2、将标准品、质控品和已稀释的样品分别用新的一次性吸嘴取10μl加入到相应的微孔中。
3、在每一微孔中加入100μl酶联物。充分混匀10秒,在这个步骤*混匀很重要。
4、室温温育30分钟。
5、倒出孔内反应物,每孔用300μl蒸馏水洗板5次,在吸水纸上拍干。注意:洗板步骤是否正确操作会明显影响实验的灵敏度和精确度。
6、在每一微孔中加入100μl底物液。
7、室温温育10分钟。
8、加50μl终止液到每个检测孔中终止酶反应。
9、加终止液后10分钟之内,用酶标仪在450±10nm处测定OD 值。
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