人半乳糖凝集素3检测试剂盒(ELISA法)
人半乳糖凝集素3检测试剂盒产品详情
中文名称 | 人半乳糖凝集素3检测试剂盒 |
英文名称 | Human Galectin-3 ELISA Kit |
产品货号 | ELH-HDF-15 |
产品规格 | 96T |
检测样本 | 血清,血浆或细胞培养上清液 |
适应物种 | 人 |
预期用途 | 可用于人血清,血浆或细胞培养上清液中半乳糖凝集素3的定量检测 |
储存条件 | 2~8℃ |
产品品牌 | 美国Raybiotech |
供应商家 | 深圳市AG九游国际生物工程有限公司 |
人半乳糖凝集素3检测试剂盒预期用途
人半乳糖凝集素3检测试剂盒可用于人血清,血浆或细胞培养上清液中半乳糖凝集素3的定量检测。仅用于科研使用。
人半乳糖凝集素3ELISA试剂盒检测原理
人半乳糖凝集素3ELISA试剂盒使用包被有人Galectin-3特异性抗体的96孔板。将标准品和样品加入到孔中,样品中存在的Galectin-3通过固定的抗体与板孔结合。洗涤板孔并加入生物素化的抗人Galectin-3抗体, 洗去未结合的生物素化抗体后,将HRP-缀合的链霉抗生物素蛋白加入到孔中。再次冲洗板孔,向孔中加入TMB底物溶液,其与所结合的Galectin-3的量成比例地显色。 终止液将溶液颜色从蓝色变为黄色,并且在450nm处测量吸光度。
人半乳糖凝集素3检测试剂盒组成成分
组分 | 表述 | 试剂预处理后保存/稳定性 |
Galectin-3酶标板(项目A) | 12*8,包被有抗人Galectin-3 | 4°C一个月 |
浓缩洗涤液(20X)(项目B) | 25ml 20X浓缩液 | 4°C一个月 |
标准蛋白(项目C) | 2瓶人Galectin-3。 1个小瓶足运行每个标准的2个重复孔 | -80°C一周 |
检测抗体GDF-15(项目F) | 2瓶生物素化的抗人类Galectin-3。 每小瓶足以测定微板的一半。 | 4°C一天 |
HRP-链霉亲和素浓缩液(项目G) | 200ul 400X浓缩HRP缀合 链霉亲和素 | 现配现用,不能保存和再次使用 |
TMB底物液(项目H) | 12ml TMB 溶液 | N/A |
终止液(项目I) | 8ml 0.2M硫酸 | N/A |
测定稀释液(项目E2) | 15ml 5X浓缩液 | 4°C一个月 |
人半乳糖凝集素3检测试剂盒实验所需材料(未提供)
1.能够测量450 nm处吸光度的酶标仪。
2.提供2μl至1 ml体积的精密移液管。
3.可调1-25毫升移液器用于试剂制备。
4.100毫升和1升刻度量筒。
5. 吸水纸。
6. 蒸馏水或去离子水。
7.双对数做图纸或计算机和软件进行ELISA数据分析。
8.准备标准品或样品稀释液的管子。
人半乳糖凝集素3检测试剂盒检测步骤
1、使用前将所有试剂和样品置于室温(18 - 25ºC)。建议所有标准和样品至少重复一次。
2、根据您的实验标记可拆卸的8孔条。
3、分别加入样品和每个标准品100μl(参见试剂制备步骤3)到适当的板孔中。盖上盖子,室温温和振荡孵育2.5小时
4、弃去溶液,用1X洗涤液洗涤4次。使用多通道移液器或自动洗板机洗板,每孔加入洗涤缓冲液(300μl)。每个步骤中去除液体对于良好的性能是至关重要的。洗完后,通过吸取或倾析清除任何剩余的洗涤缓冲液。倒置板并用干净的吸水纸吸干印迹。
5、每孔加入100μl1X制备的生物素化抗体(试剂制备步骤6)。在室温下温和振荡孵育1小时。
6、弃去溶液。重复洗涤,如步骤4。
7、加入100μl制备的链霉亲和素溶液(见试剂制备步骤7)。在室温下温和摇动孵育45分钟。
8、弃去溶液。 重复洗涤,如步骤4。
9、向每个孔中加入100μlTMB一步底物试剂(项目H)。在室温下在黑暗中轻轻振荡孵育30分钟。
10、向每个孔中加入50μl终止液(项目I)。 立即读取450 nm处吸光度值。
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