副流感IgG1/2/3 ELISA试剂盒
ELISA操作孵育过程常见问题及解答
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
3)孵育温度未按照说明书要求进行,温度过高或过低;
解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间和孵育温度
中文名称 | 副流感IgG 1/2/3 ELISA试剂盒 |
英文名称 | Parainfluenza 1/2/3 IgG ELISA |
产品货号 | RE56801 |
产品规格 | 96T |
检测样本 | 血清 |
适应物种 | 人 |
预期用途 | 可用于人血清中抗副流感病毒1/2/3 IgG抗体的体外定性和定量检测。 |
产品品牌 | 德国IBL |
供应商家 | 深圳市AG九游国际生物工程有限公司 |
副流感1/2/3IgG检测试剂盒预期用途
副流感1/2/3IgG elisa试剂盒可用于人血清中抗副流感病毒1/2/3 IgG抗体的体外定性和定量检测。
副流感1/2/3IgG检测试剂盒检测原理
副流感1/2/3IgG elisa试剂盒利用的夹心法原理。包被板上包被了抗原。用对人IgG具有特异性的酶标二抗来检测结合到包被抗原的样品特异性抗体。底物反应后,所显示的颜色强度与检测到的IgG特异性抗体的量成正比。样品的结果可直接使用标准曲线得。
副流感1/2/3IgG elisa试剂盒组成成分
4×2ml | 标准品A-D | 1;10;30;125U/mL,待用 标准品A=阴性质控 标准品B=临界质控 标准品C=弱阳性质控 标准品D=阳性质控 内含抗副流感病毒1/2/3的IgG抗体,PBS(磷酸缓冲液),稳定剂。 |
1×15ml | 酶标IgG | 红色,待用。内含过氧酶标记的抗人IgG,蛋白缓冲液,稳定剂。 |
1×12×8 | 包被板 | 可拆,包被有特异性抗原。 |
1×15ml | TMB底物液 | 含TMB |
1×15ml | TMB终止液 | 0.5M的H2SO4 |
1×60ml | 稀释液 | 含PBS缓冲液,<0.1%NaN3 |
1×60ml | 浓缩洗涤液 | 浓缩型(10×),含PBS缓冲液,吐温20 |
2× | 粘性金属板 | 用于在温育时遮盖包被板 |
1× | 塑料袋 | 用于储存不用的板条 |
副流感1/2/3IgG检测实验所需材料(试剂盒内不提供)
★移液器,体积:5;50;100;500 µL
★校准仪
★样品稀释用试管(1ml)
★带试剂储器8道移液器
★洗涤瓶,自动或半自动洗板机
★能在450nm处读数的酶标仪
★双蒸水或去离子水
★吸水纸,取样吸头和计时器
副流感1/2/3IgG elisa试剂盒实验步骤
1、加100µL标准品和已稀释样本于相应反应孔中,在定性检测中只使用标准品B。
2、封板后室温(18℃-25℃)温育60分钟。
3、移去粘性金属板,弃去孔中液体。用300µL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。
4、在每一微孔中加入100µL酶联物。
5、封板后室温(18℃-25℃)温育30分钟。
6、移去粘性金属板,弃去孔中液体。用300µL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。加底物液和终止液时,如果有条件的话,可使用8孔微量移液器。确保底物液和终止液都是相同的时间间隔加入。使用确切容积并避免气泡产生。
7、每孔加TMB底物液100µL。
8、室温(18℃-25℃)避光温育20分钟。
9、在每一微孔中加入100µLTMB终止液以终止底物反应。轻轻摇动包被板以使试剂混合均匀。此时,颜色蓝色变成黄色。
10、加终止液后60分钟内在450nm处测OD值。
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