可的松检测试剂盒（酶联免疫法）

ELISA操作孵育过程常见问题及解答：
1） 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；

2） 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。

3）孵育温度未按照说明书要求进行，温度过高或过低；

解决办法：
1） 贴封片或加盖；

2） 按说明步骤严格控制操作时间和孵育温度。

通用名称：可的松检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名称：Cortisol ELISA
产品货号：EIA1887
产品规格：96T
检测样本：血清和血浆
公司品牌：德国DRG
储存条件：2-8℃
检测方法：ELISA方法
预期用途：可用于人血清和血浆中可的松的定量检测
参考价格：询价
供应商家：深圳市AG九游国际生物工程有限公司

可的松检测试剂盒预期用途
可的松检测试剂盒用于人血清、血浆中可的松含量的定量检测。

可的松前言简介

皮质醇(氢huà可的松，复合物F)是人体中一种主要的糖皮质激素，它是由肾上腺皮质的束状带产生的。90%的循环皮质醇会结合到皮质醇结合球蛋白（CBG，皮质激素传递蛋白）上，7%的循环皮质醇会结合到白蛋白上，仅1-3%的循环皮质醇是以游离状态存在。仅仅游离状态的皮质醇才具有活性。游离皮质醇释放到唾液中，并作为皮质醇的一小部分代谢产物从肾脏排出。血液中游离皮质醇的水平可以以负反馈的形式通过下丘脑分泌的CRH（促肾上腺皮质激素释放激素）和垂体分泌的ACTH（促肾上腺皮质激素）来调节皮质醇的分泌，但皮质醇的水平也会受各种因素的影响。人体内的皮质醇有一个生理波动，在早晨达到峰值，在夜间则降至低水平。血浆皮质醇的这种起伏波动在唾液中可表现为：在人醒后的90分钟内达峰值。糖皮质激素分泌不正常的疾病可通过皮质醇的检测表现出来，如：库欣综合征和阿森氏疾病。因为皮质醇水平存在着日变化，所以在做个体皮质醇筛查或动力学实验（如地塞米松抑制实验或ACTH刺激实验）时应多采集几个时段的样品。唾液样品的采集是一个简单的采样方法，不需要方法静脉穿刺取样。孕妇、甲状腺功能低下、肾病综合征、明显肥胖和接受了不同药物治疗（包括口服bì孕药）患者的CBG水平可能会不正常，所以建议检测其唾液皮质醇。

可的松检测试剂盒检测原理

可的松ELISA试剂盒是基于竞争法的酶联免疫吸附检测试剂盒。微孔板中包被有抗可的松特异性单克隆抗体，样品中的可的松与HRP绑定的可的松竞争。洗板后，加入底物液孵育，之后再加入终止液。所绑定的过氧化物酶的量与样品中的可的松浓度成反比。

可的松检测试剂盒组成成分
●微孔板——12×8包被有抗可的松抗体
●标准品（SD 0-6）——7×1ml
●浓度0、20、50、100、200、400、800ng/ml
●换算0,  55.2,  138,  276,  552, 1104,  2208 nmol/L
●换算系数——1 ng/mL = 2.76 nmol/l——含0.3%Proclin 作为防腐剂
●酶联物——1×25ml——即用型 含HRP结合的可的松
●底物液——1×14ml——即用型 含TMB
●终止液——1×14ml——即用型 含0.5M 硫酸
●洗涤液——1×30ml——40倍浓缩

可的松检测试剂盒检测方法
●洗液稀释
●30ml+1170ml蒸馏水 混匀
●室温下2周稳定
●检测开始前将试剂盒所有组分稳定至室温

可的松检测试剂盒储存条件
可的松ELISA试剂盒保存在2-8℃下，效期内有效。

可的松检测试剂盒检测步骤
●加入20ul标准品、质控品、样品到各自的孔
●每孔加200ul酶联物，混匀
●室温下孵育60分钟（不用盖板）
●倒出孔内液体，用洗液3×400ul洗涤
●加入100ul底物液
●室温下孵育15分钟
●每孔加入100ul终止液
●450nm下读取吸光值，不超过加入终止液后的10分钟

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