磷脂IgA筛查试剂盒（酶联免疫法）

ELISA操作显色过程常见问题及解答
1） 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2） 使用变质的显色剂。

3）未使用完毕的显色剂返回原瓶造成污染

4）显色反应不避光，或有阳光直射
解决办法：
1） 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用；
2） A、B 液应避免接触金属器械。

3）使用量根据样本需要量取，取出后未使用完毕的显色液应弃去，不能再次返回原试剂瓶，以免造成显色液污染，影响下次使用；

4）TMB对光敏感，一般显色反应要避光进行；

通用名称：磷脂IgA筛查试剂盒（酶联免疫法）
英文名称：Phospholipid IgA Screen ELISA
产品货号：RE70421
产品规格：96T
检测样本：血清
公司品牌：德国IBL
储存条件：2-8℃
检测方法：ELISA方法
预期用途：用于组合定性和定量检测人血清中磷脂的IgA抗体
参考价格：询价
供应商家：深圳市AG九游国际生物工程有限公司 

磷脂IgAELISA试剂盒预期用途
       磷脂IgA筛查试剂盒用于组合定性和定量检测人血清中磷脂的IgA抗体。该测定是系统性红斑狼疮和抗磷脂综合征（APS）患者血栓形成诊断和风险评估的辅助工具。

磷脂前言介绍

       针对磷脂，生物膜组分的抗体对磷脂如心磷脂，磷脂酰肌醇，乙存胺，胆碱，鞘磷脂和磷脂酸是特异性的。系统性红斑狼疮患者血清常发现抗磷脂抗体红斑狼疮（SLE）和相关疾病。 在患有SLE和相关疾病的患者中发生抗磷脂抗体是二次抗磷脂综合征（APS）的典型。 相比之下，没有其他自身免疫性疾病的患者中的抗磷脂抗体是主要APS的特征。许多研究表明，这些自身抗体与血栓形成，血小板减少症和习惯性流产的发生率（胎盘梗死的结果）增强相关。 致病性抗磷脂抗体诱导血栓形成的确切机制尚未*揭示。

磷脂IgAELISA试剂盒检测原理

       用1:10稀释的血清样品在包被特异抗原的微孔板中孵育。 患者的抗体（如果存在于标本中）与抗原结合。 在随后的步骤中将未结合的物质洗掉。 之后辣根过氧化物酶（缀合物）缀合的抗人免疫球蛋白与微量培养板中样品的抗原 - 抗体复合物反应。未结合的共轭物在随后的步骤中洗掉。 添加TMB底物产生一个酶促比色（蓝色）反应，其被稀释的酸停止（颜色变化到黄色）。 来自底物的颜色形成的强度是其中的一种与抗原 - 抗体复合物结合的缀合物的量，并且这与患者样品中各抗体的初始浓度成比例。

磷脂IgA筛查试剂盒组成成分
●微孔板——12×8孔——每孔用高度纯化的牛心磷脂，β2-糖蛋白I，磷脂酰丝氨酸，肌醇，乙存胺，胆碱和鞘磷脂包被。
●阴性质控品——1×1.5ml——绿盖，无色，含人血清,BSA ,防腐剂
●阳性质控品——1×1.5ml——红盖，黄色，含人血清,BSA ,防腐剂
●临界标准品——1×1.5ml——蓝盖，黄色，含人血清,BSA ,防腐剂
●标准品——6×1.5ml——白盖，黄色，标准品浓度分别为：0,3,10,30,100,300U/ml，含人血清,BSA ,防腐剂。
●酶联物 IgA——1×15ml——红盖，红色，含HRP标记的抗人免疫球蛋白，BSA等
●TMB底物液——1×15ml——黑盖，无色，内含TMB及H2O2。
●终止液——1×15ml——白盖，无色，内含1M的盐酸，
●洗涤液（50X）——1×20ml——50倍浓缩，白盖，绿色，含tris.Nacl,tw-20,防腐剂
●稀释液（5X）——1×20ml——5倍浓缩，白盖，黄色，含tris.Nacl,BSA,防腐剂

磷脂IgA筛查试剂盒储存条件

       磷脂IgA筛查试剂盒应当2~8℃的环境下储存。一旦开封，重组的各试剂在2-8℃可保存一个月，磷脂IgA筛查试剂盒酶标板应在各自标识的日期内使用，TMB溶液应避光。微孔板条一但被拆开，应当将其重新密封好，并加入干燥剂。

磷脂IgA筛查试剂盒检测步骤
●准备好所需试剂。
●根据需要选择定性或定量检测。
●定性检测：每孔加入100ul阴性质控，临界质控，阳性质控和样本；定量检测，每孔加入100ul标准品A-F，阴性质控，阳性质控和样本。
●20-32℃温育30分钟。
●每孔用300μl洗涤液洗板3次（注意：洗板步骤是否操作正确会明显影响实验的灵敏度和精密度。
●在每一微孔中加入100μl酶联物。
●20-32℃温育30分钟。
●每孔用300μl洗涤液洗板3次。
●在每一微孔加TMB底物液100μl。
●20-32℃温育30分钟，避免阳光直射。
●按底物加入非顺序，每孔加100μl终止液以终止底物反应。
●至少孵育5s，并轻轻混匀
●加终止液后30min内在450nm读取OD值。（参照波长：620nm）

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