糖类抗原72-4（CA72-4）检测试剂盒（酶联免疫法）

ELISA操作终止及读板过程常见问题及解答

1. 终止液加样时产生气泡；
2. 终止不均匀
3. 酶标板板底脏污
4. 读数波长错误，
5. 终止液加入后，长时间不读板

解决办法：

1. 加终止液时，应避免起泡，以免造成假阳性
2. 终止液加入后应轻轻振板，使终止液与板孔内溶液充分混匀；
3. 酶标板读数前，应轻轻拭去板底的水迹和污物，保证板底干洁，以免影响读数；
4. 应根据底物液选择合适的读数波长，如TMB一般选择450nm波长，PNPP一般选择405nm波长等；

加入终止液后，应尽快读板，酶标板内颜色会随着终止时间的延长而变淡，因此，*是在终止后10分钟内读板。

通用名称：糖类抗原72-4检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名称：TM-CA72-4ELISA
产品货号：EIA5071
产品规格：96T
检测样本：血清、血浆
公司品牌：德国DRG
储存条件：2-8℃
检测方法：ELISA方法
预期用途：用于在人体血清或血浆中定量检测肿瘤相关抗原CA72-4 ，仅供体外诊断使用，可用于临床使用。
参考价格：询价
供应商家：深圳市AG九游国际生物工程有限公司 

TM-CA72-4ELISA检测试剂盒预期用途
      TM-CA72-4ELISA试剂盒用于在人体血清或血浆中定量检测肿瘤相关抗原CA72-4 ，仅供体外诊断使用。

糖类抗原72-4前言简介
       CA72-4(癌抗原72-4)最初被描述为由B72.3识别的抗原因子。B72.3是由相应的原发肿瘤转移后的膜萃取物免疫杂交生产的鼠单克隆抗体。CA72-4被证实是1MDa的粘液样糖蛋白，合成物称为TAG72（肿瘤相关抗原72）。TAG72蛋白的分子量为48KD. 血清和血浆中的CA72-4的水平升高见于某些恶性疾病，包括胰、胃、胆、结肠、乳腺、卵巢、子宫颈、子宫内膜的肿瘤。它对胃肠道和卵巢的肿瘤有很高的诊断学的敏感性。尽管在一些良性的疾病如风湿病和卵巢囊肿也发现有CA72-4的升高，但是临床研究表明，对于胃肠道和卵巢肿瘤，特异性诊断高达95％。CA72-4的水平和肿瘤的大小及分级紧密关联。CA72-4是胃肠道肿瘤的病人选择治疗学的监测和随后的护理的指标。另外合适的指标是CA199和CEA，另外，CA72-4是卵巢肿瘤的病人选择治疗学的监测和随后的护理的可靠性指标，尤其是对于CA125阴性的病人。

TM-CA72-4ELISA检测试剂盒检测原理
       DRG公司的TM-CA 72-4酶免实验是一种基于夹心法原理的固相酶免吸附实验（ELISA）。反应板上的微检测孔包被有能结合CA72-4分子上*抗原位点的单克隆小鼠抗体。一份含有内源性CA72-4的病人样本在包被孔中与酶联物进行孵育，该酶联物是一种联结有辣根过氧化物酶的抗CA72-4抗体。孵育后，用洗涤液洗去未结合的酶联物。结合上的辣根过氧化物酶的总量与样本中CA72-4的浓度成正相关。加入底物溶液后，显出的颜色强度与病人样品中CA72-4的浓度成正比。

糖类抗原72-4检测试剂盒组成成分
●微孔板：12×8孔，可拆，微孔中包被抗CA72-4 单克隆抗体。
●标准品（标准品0-4）：5支 0.5ml，即用，浓度为0,3，20，50，100U/ml，内含无mercury防腐剂。
●质控高&低：2支 冻干粉，0.5ml，见“试剂准备”，质控品的浓度及范围请见试剂瓶标签或质控单。内含无mercury防腐剂。
●样品稀释液：一支，3ml，即用，内含无mercury防腐剂。
●酶联物：1支 1.4ml，10倍浓缩，标记辣根过氧化物酶的抗CA72-4抗体，内含无汞防腐剂。
●酶联物稀释液：一支，14ml，即用型，含无汞防腐剂。
●底物液：一支 14ml，即用。
●终止液：0.5M的硫酸，一支 14ml，即用，避免接触终止液，以免刺激或着烧皮肤。
●洗涤液（40X）：一支 30ml.注意：用于样品稀释的样品稀释液应视需要而定。

糖类抗原72-4检测试剂盒检测步骤
●将实验所需数目的板条固定在板架上。
●用一次性吸嘴将20µL的标准品﹑质控品和样品加入相应的检测孔中。
●每孔加入100µL的新鲜配制的酶联物。*混合十秒，在此步骤里，充分摇匀十分重要。
●在室温下温育120分钟。
●快速弃去检测孔中的内含物，每孔用400µL洗涤液洗板五次，在吸水纸上用力拍板以除去残留的液体。
●每孔加入100µL的底物液。
●在室温下温育30分钟。
●每孔加入100µL的终止液终止反应。
●在加终止液后十分钟内，室温下，于450±10nm处读取吸光率。

糖类抗原72-4检测试剂盒储存条件
       TM-CA72-4ELISA试剂盒在2-8℃下储存，在保质期内保持其稳定性。不要使用过期的试剂。所有开启了的试剂都应在2-8℃下储存，2个月内有效。

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