生长激素释放因子ELISA试剂盒
(美国DRG*,货号:EIA3429 )
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预期用途
此试剂盒基于竞争酶免法检测特异性多肽和相关多肽。
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实验原理美国DRG中国*代理,。美国DRG中国*代理,。
微孔板预包被有第二抗体,非特异性结合位点封闭,主要抗体的Fab片段竞争结合生物素标记的多肽和标准品或样本中的目的多肽,二抗则与Fc片段结合。生物素标记的多肽与HRP-链霉亲和素反应,催化底物反应,黄色强度直接与生物素标记多肽-HRP-链霉亲和素复合物的量成正比,但是与标准品或样本中的多肽量成反比。根据已知浓度建立标准曲线,样本中未知浓度的多肽浓度可直接从标准曲线上读取。
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试剂盒组成美国DRG中国*代理,。美国DRG中国*代理,。
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实验所需材料但试剂盒未提供美国DRG中国*代理,。美国DRG中国*代理,。
注意:打开试剂和试验开始前先将其平衡至室温(20-23℃),强烈建议稀释过的溶液尽快使用,采血步骤见盒子内的采血说明书,每个盒子所含成分足够用于96人份检测或40人份的双孔检测。
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实验步骤美国DRG中国*代理,。美国DRG中国*代理,。
标准品准备如下美国DRG中国*代理,。 美国DRG中国*代理,。
编号 标准品的量 缓冲液的量 浓度
Stock 1000ul ---- 1000ng/ml
#1 100ul的Stock 900ul 100 ng/ml
#2 100ul的#1 900ul 10 ng/ml
#3 100ul的#2 900ul 1ng/ml
#4 100ul的#3 900ul 0.1 ng/ml
#5 100ul的#4 900ul 0.01 ng/ml
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结果计算美国DRG中国*代理,。美国DRG中国*代理,。
在半对数坐标纸上绘制标准曲线。标准品的浓度为X轴,相应的OD值为Y轴,用四参数或对数-对数法绘制zui合适的标准曲线。浓度与OD值成反比关系,随着标准品浓度的增加,黄色强度就减少,即OD值减少
样本浓度可直接从标准曲线上读取。如果样本实验前进行了稀释,则zui后结果应乘以相应的稀释因子
标准曲线为逆向S型曲线美国DRG中国*代理,。 美国DRG中国*代理,。
附:采用全自动酶标仪检测,只需检测前设置好酶标仪的相关参数,如坐标参数(线性,半对数)和计算方式参数(三次回归、四参数或双对数曲线方程),即可直接得到结果。美国DRG中国*代理,。
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贮存美国DRG中国*代理,。美国DRG中国*代理,。
样本采集的建议美国DRG中国*代理,。美国DRG中国*代理,。
血液采集美国DRG中国*代理,。美国DRG中国*代理,。
用含有EDTA的采血管采集血液,每管可装7ml,采到了抗凝血液后立即摇晃几次,将血液从采血管转至含抑肽酶的离心管,不断摇晃,抑制蛋白酶活性,1600xg转速,4℃下离心15min,,收集血浆,血浆样本可在-70℃下保存1个月。如果采血管可用于离心,可直接将抑肽酶加入至采血管内。美国DRG中国*代理,。
血浆中提取多肽美国DRG中国*代理,。美国DRG中国*代理,。
注意:步骤3-5中不能对分离柱施加任何压力
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