淀粉酶ELISA试剂盒
美国DRG*,货号EIA4460
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预期用途
此酶免试剂盒可检测人血清和尿液中的胰淀粉酶
仅供研究使用,不能用于诊断
实验原理
此酶免试剂盒依据的是夹心法原理。包被孔内包被有抗人胰淀粉酶抗体,样品与酶联物在包被孔内孵育,未结合的酶联物被洗去,样品中的人胰淀粉酶浓度与结合的酶联物量成正比,加入底物液后,样品中的人胰淀粉酶浓度与颜色的强度成正比
注意事项
1. 此试剂盒仅用于研究,不能用于诊断
2. 不同批次的试剂盒成分不能混合使用
贮存和稳定性
1. 试剂盒装在含有干燥剂的密封袋内,贮存于2-8℃冰箱内
2. 未打开的试剂盒可保存至有效期
3. TMB底物液带有微弱的颜色,如变蓝,则应丢弃。贮存或使用期间不要将试剂暴露于强光下。
试剂盒组成
1. 微孔板,96T,包被有抗人胰淀粉酶抗体
2. 样品稀释液,11ml,1瓶
3. 酶联物,11ml,HRP标记的抗人胰淀粉酶抗体
4. 参考标准品0.3ml/支,浓度为:10,50,150,300,600U/L
5. 质控品,0.3ml,参考值见瓶身
6. TMB底物液,11ml,含过氧化氢和TMB的缓冲液
7. 洗涤缓冲液,100X,10ml,工作洗涤液的配制:10ml洗涤液+990ml去离子水
8. 终止液,2N HCL
9. 板架
实验所需材料但试剂盒未提供
1. 酶标仪
2. 移液器,体积“10,50,100ul
3. 1L洗涤缓冲液
样品采集与处理
静脉穿刺采集全血,允许凝集,室温下通过离心分离出血清,贮存于无菌试管内
如果血清不立即使用,则可保存于2-8℃下1个月,或是在-20℃冻存6个月。避免反复冻融
实验准备
1. 实验前,将所有试剂平衡至室温,轻轻振荡
2. 准备好实验所需的所有试剂,一旦实验开始,就不能中断
3. 每个样品都使用新枪头吸取
实验步骤
1. 将实验所需的板条固定好
2. 加10ul的标准品和样品于相应的孔内
3. 每孔加入100ul的酶联物
4. 室温下孵育60min
5. 洗涤液洗板5次(300ul/孔)
6. 每孔加入100ul的TMB底物液,包括blank 孔
7. 室温下孵育30min
8. 每孔加50ul终止液终止反应,然后在酶标仪450nm处读数
结果计算
1. 以参考标准品的浓度为X轴,吸收值为Y轴,在坐标纸上绘制曲线
2. 从标准曲线上可得到样品中胰淀粉酶的值
标准曲线经典例子
附:采用全自动酶标仪检测,只需检测前设置好酶标仪的相关参数,如坐标参数(线性,半对数)和计算方式参数(三次回归、四参数或双对数曲线方程),可直接得出结果
本译文仅供参考,详情请以原文为准。
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