TNF-α检测试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）已知TNF-α浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TNF-α和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TNF-α的浓度呈比例关系。

 

　　自备材料：

 

　　1、蒸馏水。

 

　　2、加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

 

　　3、振荡器及磁力搅拌器等。

 

　　安全性：

 

　　1、避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

 

　　2、实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

 

　　3、不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

 

　　操作注意事项：

 

　　1、试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

 

　　2、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

 

　　3、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

 

　　4、使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

 

　　5、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

 

　　6、洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

 

　　7、底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

 

　　8、加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

 

　　9、按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。